重組IgM抗體表達(dá)服務(wù)

IgM的結(jié)構(gòu)與功能

免疫球蛋白M(Immunoglobulin M,IgM)是機(jī)體免疫應(yīng)答中最早產(chǎn)生的抗體類型之一,也是結(jié)構(gòu)最復(fù)雜的抗體亞型。與IgG不同,IgM通常以五聚體(pentamer)或六聚體(hexamer)形式存在,由多個(gè)IgM單體通過J鏈(J chain)連接形成高度多價(jià)的復(fù)合結(jié)構(gòu)。這種天然的多價(jià)結(jié)構(gòu)賦予IgM抗體極強(qiáng)的抗原凝集能力、高效的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性及在低親和力條件下仍具備高功能親和力等特性。因此,IgM抗體在腫瘤免疫與補(bǔ)體通路研究、病毒和細(xì)菌的早期中和研究、多價(jià)抗體與工程化抗體開發(fā)及體外診斷(IVD)中早期感染標(biāo)志物檢測(cè)中具有不可替代的價(jià)值。近年來,隨著IgM工程化與多價(jià)抗體藥物開發(fā)的興起,IgM正重新成為抗體研發(fā)中的重要分子形式。

不同類型抗體結(jié)構(gòu)

然而,正是這種賦予IgM強(qiáng)大免疫功能的多聚體結(jié)構(gòu),也使其重組表達(dá)變得更加困難。IgM具有分子量大、糖基化復(fù)雜且對(duì)正確折疊要求極高等特點(diǎn),對(duì)細(xì)胞系選擇、載體設(shè)計(jì)以及純化工藝提出了更高要求。因此,長(zhǎng)期以來,如何穩(wěn)定、可規(guī)?;刂苽涓哔|(zhì)量重組IgM一直被認(rèn)為是抗體工程領(lǐng)域中的關(guān)鍵技術(shù)瓶頸。

IgM重組表達(dá)挑戰(zhàn)

  • 結(jié)構(gòu)復(fù)雜,表達(dá)不穩(wěn)定
  • 功能驗(yàn)證難度高
  • 易發(fā)生聚集,純化困難
  • 項(xiàng)目差異大,難以“一刀切”
  • 表達(dá)失敗風(fēng)險(xiǎn)高

為什么選擇締碼生物?

  • 成熟的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)平臺(tái)
  • 自有靶點(diǎn)蛋白庫,支持功能驗(yàn)證
  • IgM專用純化流程
  • 多種可定制的純化方案
  • 無表達(dá)=不收費(fèi)

服務(wù)周期與內(nèi)容

DIMA BIOTECH's recombinant IgM antibody service content

案例展示

Anti-TIM3 antibody(DM81) IgM mAb

Anti-TIM3 (DM81) IgM mAb function elisa

Human TIM3 Protein, hFc Tag binds Anti-TIM3 antibody IgM mAb with EC50: 8.882ng/mL

The purity of Anti-TIM3 antibody(DM81) IgM mAb determined by SDS-PAGE

IgM重組抗體表達(dá)服務(wù)常見問答(FAQ)

1、為什么 IgM 重組表達(dá)具有挑戰(zhàn)性?

IgM 具有獨(dú)特的五聚體/六聚體結(jié)構(gòu),分子量大且糖基化復(fù)雜,使其在折疊、組裝和分泌過程中面臨顯著挑戰(zhàn)。此外,IgM對(duì)表達(dá)環(huán)境要求更高,常規(guī)IgG的純化流程通常并不適用于IgM,這也是IgM重組表達(dá)被認(rèn)為技術(shù)門檻較高的核心原因之一。


2、是否支持J鏈(J-chain)共表達(dá)?

支持。我們可根據(jù)項(xiàng)目需求提供J鏈共表達(dá)(J-chain co-expression),以獲得結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的五聚體IgM,從而提高IgM的結(jié)構(gòu)完整性與功能一致性。


3、如何驗(yàn)證IgM抗體的功能活性?

我們可利用內(nèi)部靶點(diǎn)蛋白資源,開展多種功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),包括:

  • ELISA(結(jié)合活性分析)
  • 流式細(xì)胞術(shù)(FACS)(細(xì)胞結(jié)合驗(yàn)證)
  • 補(bǔ)體激活實(shí)驗(yàn)(Complement Activation / CDC)

通過上述方法,系統(tǒng)評(píng)估IgM的結(jié)構(gòu)完整性與生物學(xué)活性。


4、IgM純化過程中是否容易發(fā)生聚集?

IgM 在純化過程中確實(shí)更容易發(fā)生聚集或降解。為此,我們采用專門針對(duì)IgM優(yōu)化的純化策略,在工藝設(shè)計(jì)和緩沖體系上有效降低聚集、降解及結(jié)構(gòu)破壞的風(fēng)險(xiǎn),確保產(chǎn)物質(zhì)量穩(wěn)定。


5、IgM重組表達(dá)項(xiàng)目通常交付哪些數(shù)據(jù)?

標(biāo)準(zhǔn)交付內(nèi)容通常包括:

  • SDS-PAGE
  • SEC分析(可選,用于多聚體狀態(tài)評(píng)估)
  • ELISA/FACS功能數(shù)據(jù)
  • 抗體濃度與純度
  • 多聚體完整性分析結(jié)果

6、如果IgM表達(dá)失敗,是否仍然收費(fèi)?

不會(huì)。我們執(zhí)行零風(fēng)險(xiǎn)合作政策:No Protein = No Charge(無表達(dá),不收費(fèi)),最大程度降低客戶在IgM重組表達(dá)項(xiàng)目中的研發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。