阻斷抗體篩選服務(wù)

什么是阻斷抗體（Blocking Antibodies）？

阻斷抗體（Blocking Antibodies），也稱(chēng)為拮抗性抗體或功能性抗體，是能夠抑制特定配體–受體相互作用或信號(hào)通路的抗體。通過(guò)阻止這些相互作用，阻斷抗體有助于：

  • 理清治療靶點(diǎn)的作用機(jī)制（MoA）
  • 判斷候選抗體是否能中斷功能性結(jié)合事件
  • 確定抗體與靶點(diǎn)結(jié)合的生物學(xué)相關(guān)性
  • 評(píng)估候選抗體成為治療性拮抗劑的可能性?

阻斷實(shí)驗(yàn)，如基于ELISA的阻斷、基于細(xì)胞的流式細(xì)胞術(shù)阻斷、以及SPR/BLI競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)，因而成為抗體藥物開(kāi)發(fā)中從早期發(fā)現(xiàn)、先導(dǎo)篩選到功能驗(yàn)證的重要工具。

阻斷抗體篩選挑戰(zhàn)

盡管阻斷抗體篩選非常關(guān)鍵，但在內(nèi)部建立這類(lèi)篩選通常面臨以下困難：

  • 開(kāi)發(fā)周期長(zhǎng)：構(gòu)建穩(wěn)定、高靈敏的阻斷實(shí)驗(yàn)需要數(shù)周時(shí)間優(yōu)化
  • 可重復(fù)性差：配體質(zhì)量、抗體滴定或細(xì)胞狀態(tài)的變化會(huì)導(dǎo)致結(jié)果不一致
  • 技術(shù)復(fù)雜：不同實(shí)驗(yàn)體系需要各自專(zhuān)業(yè)知識(shí)和設(shè)備支持
  • 高資源消耗：試劑、人工及反復(fù)優(yōu)化大大增加成本
  • 缺乏經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的對(duì)照：沒(méi)有可靠的陽(yáng)性抗體難以確認(rèn)實(shí)驗(yàn)性能

為什么選擇締碼生物？

為了解決上述難題，締碼生物建立了全面的阻斷抗體篩選平臺(tái)，涵蓋多種經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的靶點(diǎn)阻斷檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)快速且可靠的功能性抗體評(píng)價(jià)：

  • 多種經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的阻斷實(shí)驗(yàn)方法已建立
  • 支持多種分析格式:ELISA或基于細(xì)胞的流式（FC）阻斷實(shí)驗(yàn)
  • 高靈敏度與可重復(fù)性：每個(gè)實(shí)驗(yàn)使用表征良好的陽(yáng)性對(duì)照以確保一致性
  • 支持高通量與多種樣品類(lèi)型：納米抗體、兔/人/小鼠抗體、雙特異性抗體庫(kù)等

服務(wù)流程與內(nèi)容

workflow for blocking antibody screening service

案例展示

IL6R blocking ELISA assay

IL6R blocking ELISA assay

Competitive ELISA showing inhibition of IL-6R–ligand binding by a tocilizumab biosimilar. Serial antibody dilutions were incubated with IL-6R-hFc, followed by IL-6-mFc-His detection. The blocking curve yields an IC?? of 35.11 ng/mL.

IL7RA Blocking ELISA assay

Competitive ELISA showing inhibition of IL-7RA–ligand binding by a Bempikibart biosimilar. Serial antibody dilutions were incubated with IL-7RA-hFc, followed by biotinylated lL7-hFc detection. The blocking curve yields an IC?? of 25.96 ng/mL.

已開(kāi)發(fā)阻斷抗體篩選方法的靶點(diǎn)

Target Protein Reference Antibody Method
41BBL 41BB SC113.153 ELISA
ACVR2A Activin A bimagrumab ELISA
ACVR2B Activin A bimagrumab ELISA
Canine IL31 Canine IL31RA lokivetmab ELISA
Feline IL31 Feline IL31RA dovanvetmab ELISA
CD47 SIRPα magrolimab FACS
CSF1R M-CSF cabiralizumab ELISA
DLL3 Antibody epitope competition assay tarlatamab ELISA
EGFR EGF Cetuximab ELISA
HER3 NRG1 seribantumab
patritumab		 ELISA
IL21 IL21R avizakimab ELISA
IL21R IL21 IL21R BM ELISA
Target Protein Reference Antibody Method
IL31RA IL-31 nemolizumab ELISA
IL4RA IL4 dupilumab ELISA
IL6R IL6 tocilizumab ELISA
IL7RA IL7 bempikibart ELISA
IL7RA IL7 bempikibart FACS
MET HGF emibetuzumab ELISA
OX40 OX40L KH 72577-3 FACS
PD1 PDL1 pembrolizumab ELISA
Canine PD1 Canine PDL1 INTERVET 4F12 FACS
PDL1 PD1 atezolizumab FACS
TIGIT CD155 etigilimab FACS

阻斷抗體篩選服務(wù)常見(jiàn)問(wèn)題（FAQ）

1. 阻斷抗體篩選支持哪些類(lèi)型的抗體樣本？

我們的阻斷抗體篩選服務(wù)支持多種抗體來(lái)源與格式，包括：

  • 純化抗體：IgG、Fab、VHH（Nanobody）
  • 雜交瘤上清（Hybridoma supernatant）
  • B 細(xì)胞培養(yǎng)上清
  • 腹水樣本（Ascites fluid）
  • 噬菌體展示抗體庫(kù)（如有需要，可提供抗體表達(dá)支持）

根據(jù)樣本的體積、純度及表達(dá)形式，我們將匹配最合適的ELISA或基于細(xì)胞的阻斷篩選方法，確保數(shù)據(jù)可靠性。

2. 阻斷抗體篩選需要多少樣本量？

不同樣本類(lèi)型對(duì)應(yīng)的常規(guī)用量如下：

  • 純化抗體：≥50 μg（用于初篩；IC??分析階段需更多用量）
  • 抗體上清樣本：≥200μL，濃度 ≥2μg/mL
  • 腹水樣本：≥200-500μL

若樣本量受限，我們可提供小規(guī)?？贵w表達(dá)或純化服務(wù)，幫助項(xiàng)目順利推進(jìn)。

3. 阻斷抗體篩選通常采用哪些實(shí)驗(yàn)方法？

我們根據(jù)靶點(diǎn)特性與應(yīng)用場(chǎng)景，采用以下成熟方法進(jìn)行功能性抗體篩選：

  • 基于ELISA的競(jìng)爭(zhēng)性阻斷實(shí)驗(yàn)：適用于配體-受體相互作用阻斷；高通量、數(shù)據(jù)穩(wěn)定，適合早期篩選
  • 基于流式細(xì)胞術(shù)（FACS）的阻斷實(shí)驗(yàn)：在細(xì)胞表面檢測(cè)抗體阻斷效果；更貼近真實(shí)生物學(xué)環(huán)境

實(shí)驗(yàn)方案會(huì)針對(duì)每個(gè)靶點(diǎn)進(jìn)行優(yōu)化，以確保高重復(fù)性與可比性。

4. 阻斷抗體活性是如何評(píng)估的？

阻斷活性評(píng)估通?；谝韵玛P(guān)鍵指標(biāo)：

  • 阻斷百分比（%Blocking/%Inhibition）
  • 劑量-反應(yīng)曲線與IC??數(shù)值
  • 與已知陽(yáng)性對(duì)照抗體的對(duì)比分析

此外，還可根據(jù)項(xiàng)目需求加入功能性讀出，如信號(hào)通路抑制、細(xì)胞功能或表型變化。

5. 初篩與IC??分析有何區(qū)別？

  • 初篩：快速篩選具有潛在阻斷活性的抗體；適用于抗體庫(kù)或大量樣本
  • IC??分析：對(duì)命中抗體進(jìn)行定量評(píng)價(jià)；判斷真實(shí)阻斷效力和開(kāi)發(fā)潛力

二者結(jié)合，可對(duì)抗體的功能性阻斷能力進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)估。

6. 阻斷抗體篩選項(xiàng)目周期需要多久？

標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目周期如下：

  • 阻斷初篩：約5-10個(gè)工作日
  • IC??定量分析：約7-14個(gè)工作日
  • 基于細(xì)胞的功能實(shí)驗(yàn)（可選）：額外1-2周

對(duì)于時(shí)間敏感項(xiàng)目，可提供加急篩選服務(wù)。

7. 阻斷抗體篩選數(shù)據(jù)報(bào)告包含哪些內(nèi)容？

標(biāo)準(zhǔn)交付的數(shù)據(jù)報(bào)告包括：

  • 初篩階段的阻斷率（%inhibition）
  • IC??分析階段的劑量-反應(yīng)曲線與IC??數(shù)值
  • 表位競(jìng)爭(zhēng)/BLI數(shù)據(jù)（如適用）
  • 功能性實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)（如已開(kāi)展）
  • 實(shí)驗(yàn)條件、QC信息與數(shù)據(jù)說(shuō)明
  • 技術(shù)總結(jié)及后續(xù)抗體開(kāi)發(fā)建議

8. 是否可以進(jìn)行抗體表位競(jìng)爭(zhēng)分析？

可以。我們可通過(guò)BLI或SPR技術(shù)進(jìn)行：

  • 配體競(jìng)爭(zhēng)分析
  • 受體競(jìng)爭(zhēng)分析
  • 抗體–抗體表位重疊評(píng)估

如需更精細(xì)的表位解析，也可引入突變體蛋白用于深入表位映射。

9. 阻斷抗體篩選是否需要客戶(hù)提供靶點(diǎn)蛋白或細(xì)胞模型？

不一定。我們可提供：多種標(biāo)簽形式的重組蛋白（多種常見(jiàn)靶點(diǎn)現(xiàn)貨可用）及已建立的穩(wěn)定或瞬時(shí)表達(dá)細(xì)胞系。客戶(hù)也可提供自有抗原或細(xì)胞模型，用于定制化阻斷篩選方案。

10. 阻斷抗體篩選服務(wù)是否支持NDA保密協(xié)議？

支持。所有樣本、實(shí)驗(yàn)流程與數(shù)據(jù)均在簽署保密協(xié)議（NDA）后嚴(yán)格保密，確?？蛻?hù)項(xiàng)目安全。